שני הנהגים שהיו מעורבים בתאונה שבעקבותיה האוטובוס התהפך בכביש 443 ליד בית חורון יזומנו לחקירה כאשר ישתחררו מבית החולים. מחקירה ראשונית של התאונה עלה כי בצדו השני של הכביש אירעה התאונה, בה היו מעורבים שני הנהגים. רכב מסחרי ובו מתנדבים באיחוד הצלה בלם בלימת חירום על מנת לטפל בנפגעי התאונה, וכתוצאה מכך פגע נהג האוטובוס ברכב והתהפך.